martes, 30 de junio de 2009

FACTOR REUMATOIDE




El FR-Latex Test es una prueba rápida de aglutinación basada en una modificación de la técnica de Singer1, para la detección directa y la semicuantificación en porta de los factores reumatoideos (FR) presentes en el suero.

La determinación se efectúa ensayando una suspensión de partículas de látex recubiertos con gamma globulina humana frente a los sueros problema. La presencia o ausencia de aglutinación
visible es indicativa de la presencia o ausencia de FR en las muestras ensayadas

COMPOSICION DE LOS REACTIVOS
Reactivo FR-Latex. Suspensión estabilizada y tamponada de
partículas de látex recubiertas con gamma globulina humana.
Contiene 0,95 g/L de acida sódica.

CONTROL +
Suero humano con una actividad aproximada equivalente a 25
UI/mL. Contiene 0,95 g/L de acida sódica.

CONTROL -
Suero animal con una actividad inferior a 5 UI/mL. Contiene
0,95 g/L de acida sódica.

Precauciones: En la preparación de reactivos de origen humano,
intervienen solamente materiales que, frente a técnicas probadas, han
mostrado su negatividad frente a anticuerpos anti-HIV 1+2, anticuerpos anti-
HCV y HBsAg. Tratarlos, no obstante, como si fueran potencialmente
infecciosos.

Aviso: Los reactivos de este kit contienen acida sódica. Evitar el contacto
con la piel y mucosas.

ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD
Conservar a 2-8ºC. No congelar los componentes del kit ya
que podría verse afectada la funcionalidad del test.
El Reactivo y los Controles son estables hasta la fecha de
caducidad indicada en la etiqueta.

PREPARACION DE LOS REACTIVOS
El Reactivo y los Controles están listos para su uso.

MUESTRAS
Suero claro, reciente.
Una vez separado, el suero puede guardarse a 2-8ºC durante una
semana antes del ensayo, o por un período mayor a –20ºC.

EQUIPO ADICIONAL
Pipetas de volumen variable. Solución salina (NaCl 0,9%, para técnica semi-cuantitativa).
Agitador mecánico rotatorio de velocidad regulable a 100 r.p.m.
Cronómetro

TECNICA
Prueba cualitativa
1.Equilibrar reactivos y muestras a temperatura ambiente (Resuspender el antígeno con suavidad.
2.Aspirar y vaciar varias veces el cuentagotas para asegurar su homogeneidad antes del ensayo.
3.Depositar 1 gota (50 ìL) de suero problema en uno de los
círculos de la tarjeta visualizadora.
4.En círculos adicionales, depositar 1 gota de control positivo y 1 gota de control negativo.
5.Añadir a cada círculo 1 gota de Reactivo FR-Latex, próxima a la muestra a analizar.
6.Efectuar la mezcla con ayuda de un palillo desechable,
extendiéndola de forma que cubra por completo la superficie
interior de cada anillo.
7.Emplear palillos distintos para cada mezcla.
8.Mover la tarjeta con agitador rotatorio (100 r.p.m.) durante 2 minutos
9.Observar de inmediato con la ayuda de una luz adecuada, la aparición de cualquier signo de aglutinación.

Lectura
Reacción negativa: Suspensión uniforme sin cambio visible
alguno, tal como se presenta en el control negativo.
Reacción positiva: Aglutinación débil o intensa, fácilmente
visible macroscópicamente.

Prueba semi-cuantitativa
1.Para cada muestra a analizar se utilizan 6 círculos de una
tarjeta pipeteando 50 ìL de solución salina (0,9%) en cada uno
de ellos.
2.Pipetear sobre el diluyente del primer círculo 50 ìL de muestra,
y empleando la misma punta, mezclar mediante aspiraciones y
expulsiones repetidas, transfiriendo 50 ìL de la mezcla
resultante sobre el diluyente del segundo círculo.
3.Continuar con la serie de dobles diluciones hasta el sexto
círculo, desechando los 50 ìL provenientes del mismo. Las
diluciones finales obtenidas serán: 1:2, 1:4, 1:8, 1:16, 1:32, 1:64.
4.Ensayar cada una de las diluciones tal como se describe en la Prueba cualitativa.

SIGNIFICADO CLINICO
Los factores reumatoideos son un grupo de anticuerpos,
mayoritariamente de la clase IgM, dirigidos contra determinantes
de la porción Fc de la inmunoglobulina IgG del paciente.
Aunquepresentes en diversas enfermedades se hallan elevados
principalmente en pacientes con artritis reumatoidea.
En el diagnóstico clínico, los resultados de la determinación de los
factores reumatoideos deben ser considerados siempre en relación
a los hallazgos clínicos y otras pruebas de laboratorio.

LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
Se han descrito reacciones positivas en condiciones clínicas
distintas a la artritis reumatoidea como la mononucleosis,
hepatitis, sífilis, infecciones diversas y en personas de edad
avanzada. La mayoría de estos casos, cuando se ensayan
cuantitativamente, presentan títulos de FR muy bajos.
Pueden darse reacciones negativas falsas tanto en la fase
temprana como en la fase crónica sub-clínica de la enfermedad.

2 comentarios:

Anónimo dijo...

Melissa hay Reactivos de ciertas casas que no te reporatn la concentracion ,escoge mejor metodos al medico le interesa la sensibilidad de la prueba por que asi la mutiplica por la dilucion.Te felicito por que eres la segunda tecnico que tienes este tipo de publicaciones.

MELISSA MARTINEZ dijo...

Muchas gracias por su comentario!