FACTOR REUMATOIDE

El FR-Latex Test es una prueba rápida de aglutinación basada en una modificación de la técnica de Singer1, para la detección directa y la semicuantificación en porta de los factores reumatoideos (FR) presentes en el suero.

La determinación se efectúa ensayando una suspensión de partículas de látex recubiertos con gamma globulina humana frente a los sueros problema. La presencia o ausencia de aglutinación
visible es indicativa de la presencia o ausencia de FR en las muestras ensayadas

COMPOSICION DE LOS REACTIVOS
Reactivo FR-Latex. Suspensión estabilizada y tamponada de
partículas de látex recubiertas con gamma globulina humana.
Contiene 0,95 g/L de acida sódica.

CONTROL +
Suero humano con una actividad aproximada equivalente a 25
UI/mL. Contiene 0,95 g/L de acida sódica.

CONTROL -
Suero animal con una actividad inferior a 5 UI/mL. Contiene
0,95 g/L de acida sódica.

Precauciones: En la preparación de reactivos de origen humano,
intervienen solamente materiales que, frente a técnicas probadas, han
mostrado su negatividad frente a anticuerpos anti-HIV 1+2, anticuerpos anti-
HCV y HBsAg. Tratarlos, no obstante, como si fueran potencialmente
infecciosos.

Aviso: Los reactivos de este kit contienen acida sódica. Evitar el contacto
con la piel y mucosas.

ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD
Conservar a 2-8ºC. No congelar los componentes del kit ya
que podría verse afectada la funcionalidad del test.
El Reactivo y los Controles son estables hasta la fecha de
caducidad indicada en la etiqueta.

PREPARACION DE LOS REACTIVOS
El Reactivo y los Controles están listos para su uso.

MUESTRAS
Suero claro, reciente.
Una vez separado, el suero puede guardarse a 2-8ºC durante una
semana antes del ensayo, o por un período mayor a –20ºC.

EQUIPO ADICIONAL
Pipetas de volumen variable. Solución salina (NaCl 0,9%, para técnica semi-cuantitativa).
Agitador mecánico rotatorio de velocidad regulable a 100 r.p.m.
Cronómetro

TECNICA
Prueba cualitativa
1.Equilibrar reactivos y muestras a temperatura ambiente (Resuspender el antígeno con suavidad.
2.Aspirar y vaciar varias veces el cuentagotas para asegurar su homogeneidad antes del ensayo.
3.Depositar 1 gota (50 ìL) de suero problema en uno de los
círculos de la tarjeta visualizadora.
4.En círculos adicionales, depositar 1 gota de control positivo y 1 gota de control negativo.
5.Añadir a cada círculo 1 gota de Reactivo FR-Latex, próxima a la muestra a analizar.
6.Efectuar la mezcla con ayuda de un palillo desechable,
extendiéndola de forma que cubra por completo la superficie
interior de cada anillo.
7.Emplear palillos distintos para cada mezcla.
8.Mover la tarjeta con agitador rotatorio (100 r.p.m.) durante 2 minutos
9.Observar de inmediato con la ayuda de una luz adecuada, la aparición de cualquier signo de aglutinación.

Lectura
Reacción negativa: Suspensión uniforme sin cambio visible
alguno, tal como se presenta en el control negativo.
Reacción positiva: Aglutinación débil o intensa, fácilmente
visible macroscópicamente.

Prueba semi-cuantitativa
1.Para cada muestra a analizar se utilizan 6 círculos de una
tarjeta pipeteando 50 ìL de solución salina (0,9%) en cada uno
de ellos.
2.Pipetear sobre el diluyente del primer círculo 50 ìL de muestra,
y empleando la misma punta, mezclar mediante aspiraciones y
expulsiones repetidas, transfiriendo 50 ìL de la mezcla
resultante sobre el diluyente del segundo círculo.
3.Continuar con la serie de dobles diluciones hasta el sexto
círculo, desechando los 50 ìL provenientes del mismo. Las
diluciones finales obtenidas serán: 1:2, 1:4, 1:8, 1:16, 1:32, 1:64.
4.Ensayar cada una de las diluciones tal como se describe en la Prueba cualitativa.

SIGNIFICADO CLINICO
Los factores reumatoideos son un grupo de anticuerpos,
mayoritariamente de la clase IgM, dirigidos contra determinantes
de la porción Fc de la inmunoglobulina IgG del paciente.
Aunquepresentes en diversas enfermedades se hallan elevados
principalmente en pacientes con artritis reumatoidea.
En el diagnóstico clínico, los resultados de la determinación de los
factores reumatoideos deben ser considerados siempre en relación
a los hallazgos clínicos y otras pruebas de laboratorio.

LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
Se han descrito reacciones positivas en condiciones clínicas
distintas a la artritis reumatoidea como la mononucleosis,
hepatitis, sífilis, infecciones diversas y en personas de edad
avanzada. La mayoría de estos casos, cuando se ensayan
cuantitativamente, presentan títulos de FR muy bajos.
Pueden darse reacciones negativas falsas tanto en la fase
temprana como en la fase crónica sub-clínica de la enfermedad.

RPR

El antígeno RPR-carbon es un preparado no treponémico
especialmente diseñado para la detección y semi-cuantificación
por coaglutinación macroscópica en porta o microplaca de
reaginas plasmáticas, un grupo de anticuerpos dirigidos contra
componentes tisulares producidos por los pacientes infectados por T. pallidum.

La determinación rápida de las reaginas plasmáticas se efectúa
ensayando el antígeno –una asociación de lípidos complejos y
carbón- frente a las muestras problema. La presencia o ausencia
de una aglutinación visible es indicativa de la presencia o ausencia
de reaginas luéticas en las muestras ensayadas1-4 .

COMPOSICION DE LOS REACTIVOS
Antígeno RPR-carbon. Suspensión estabilizada conteniendo
cardiolipina 0,003%, lecitina 0,020-0,022%, colesterol 0,09%,
cloruro de colina 10%, EDTA 0,0125 mol/L, micropartículas de
carbón 0,01%, en tampón fosfato. Contiene 0,1% de
mertiolato sódico.

CONTROL +
Suero de conejo inmune. Contiene 0,95 g/L de acida sódica.

CONTROL -
Suero animal. Contiene 0,95 g/L de acida sódica

ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD
Conservar a 2-8ºC. No congelar los componentes del kit ya
que podría verse afectada la funcionalidad del test.
El Antígeno y los Controles son estables hasta la fecha de
caducidad indicada en la etiqueta

PREPARACION DE LOS REACTIVOS
Resuspender el Antígeno con suavidad para asegurar su
homogeneidad, acoplar la aguja dosificadora al vial dispensador y
aspirar la cantidad de antígeno que se considere necesaria.
Los Controles están listos para su uso.

MUESTRAS
Suero o plasma claro, reciente, sin inactivar.
Una vez separado, el suero puede guardarse a 2-8ºC durante 48
horas antes del ensayo, o hasta meses a –20ºC. Los plasmas se
ensayarán dentro de las 48 siguientes a su obtención

EQUIPO ADICIONAL
Pipetas de volumen variable. Solución salina (NaCl 0,9%, para técnica semi-cuantitativa).
Agitador mecánico rotatorio de velocidad regulable a 100 r.p.m.
que circunscriba un círculo de unos 2 cm de diámetro en el
plano horizontal. Cronómetro.

Prueba cualitativa
1.Equilibrar reactivos y muestras a temperatura ambiente (Mediante una pipeta automática depositar 50 ìL de cada muestra en un círculo distinto de la tarjeta visualizadora.)
2.Emplear una punta nueva para cada muestra y desecharla tras
su empleo.
3.En dos círculos adicionales, depositar 1 gota de
cada uno de los sueros control.
4.Agitar el vial dispensador del antígeno y manteniéndolo en
posición vertical, presionar ligeramente hasta asegurarse que
la aguja esta libre de aire y que la gota obtenida es correcta.
5.Con el vial dispensador invertido, situar la aguja en posición
vertical perpendicular a la tarjeta visualizadora
6.Oprimir suavemente el vial dispensador, dosificando 1 gota de
antígeno en cada círculo, próximo a la muestra que debe
ensayarse
7.Efectuar la mezcla con ayuda de un palillo desechable,
extendiéndola de forma que cubra por completo la superficie
interior de cada anillo.
8.Emplear palillos distintos para cada mezcla.
9.Depositar la tarjeta en el agitador rotatorio horizontal,
previamente ajustado a 100 r.p.m., durante 8 minutos.
10.Observar con la ayuda de una lámpara de alta intensidad o
frente a luz diurna fuerte, la aparición de cualquier signo de
aglutinación dentro del minuto siguiente a la retirada de la
tarjeta del agitador.

Lectura
Reacción negativa: Las partículas de carbón permanecen en
suspensión homogénea, sin presencia visible de agregados, tal
como se presenta en el control negativo.
Reacción positiva: Un resultado positivo se manifiesta por una
agregación de las partículas de carbón, que puede variar entre
una ligera pero claramente definida agregación y una marcada
e intensa.

Prueba cuantitativa
Para cada muestra a analizar se utilizan 5 círculos de una
tarjeta pipeteando 50 ìL de solución salina (0,9%) en cada uno
de ellos.

1.Pipetear sobre el diluyente del primer círculo 50 ìL de muestra,
y empleando la misma punta, mezclar mediante aspiraciones y
expulsiones repetidas, transfiriendo 50 ìL de la mezcla
resultante sobre el diluyente del segundo círculo.
2.Continuar con la serie de dobles diluciones hasta el quinto
círculo, desechando los 50 ìL provenientes del mismo. Las
diluciones finales obtenidas serán: 1:2, 1:4, 1:8, 1:16, 1:32.
3.Ensayar cada una de las diluciones
4. El título de la muestra corresponde a la máxima dilución que presenta reactividad.
La dilución siguiente debe ser negativa.
5.En caso de resultar reactiva la dilución más alta ensayada, repetir el ensayo
comenzando con una dilución preliminar al 1:16.
6.Comodiluyente de esta nueva serie de dobles diluciones se empleará
Control negativo diluido al 1:50 con solución salina, en vez de
la solución salina empleada anteriormente.

LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
Tanto en las infecciones tempranas como en los últimos estadios
de la enfermedad pueden darse reacciones negativas falsas. Se han descrito con antígenos cardiolipínicos falsas
positividades en enfermedades tales como la mononucleosis
infecciosa, lupus eritematoso y neumonía viral. El embarazo, la
adicción a narcóticos y las enfermedades autoinmunes pueden
asimismo dar reacciones positivas falsas.
No utilizar con líquido cefalorraquídeo.

SELECCION DE DONANTES

Tipos de donantes:
*Donantes voluntarios o altruistas
*Donantes familiares o por reposicion
*Remunerados

Examen medico:
*Examen fisico: Aspecto general de la persona.
(tatuajes, erupciones, ebriedad etc)
*Peso minimo: 115 lbs
*T° no mayor a 37.5°c
* P/A no menor de 105/60 y no mayor de 140/85
*Hematocrito: en mujer no menor de 38% y en hombre no menor de 40%
*Intervalos de donacion
*Se realiza una ficha con informacion proporcionada por el donante donde se tocan puntos referentes a su conducta sexual, medicamentos, uso de drogas, historia clinica, y cualquier informacion util para asegurar la calidad de la donacion tanto para el donante como para el receptor de la unidad.

BANCO DE SANGRE

FUNCION DE LOS ANTICOAGULANTES MAS USADOS EN BANCO DE SANGRE:
*Asegurar la sobrevida de los GR.
*Preservar la inalterabilidad de la membrana.
*Velar que los GB y Pk conserven su funcion por mayor tiempo.
*Conservar los factores de coagulacion evitando la desnaturalizacion.
*Prevenir desarrollo microbiano.

SUSTANCIAS DE ANTICOAGULANTES
*Citrato de sodio:
Fija los iones de calcio en la sangre y los intercambia por sal de sodio que impide la coagulacion.

*Fosfato:
Apoya el metabolismo de los GR durante el almacenamiento para asegurar que liberen el oxogeno a los tejidos.

*Dextrosa:
Mantiene la membrana del GR

*Adenina:
Provee energia al GR

TIPOS DE ANTICOAGULANTES:
*ACD: Acido citrato dextrosa (21 dias)
*CPD: Citrato fosfato dextrosa (28 dias)
*CPDA1: Citrato fosfato dextrosa adenina (35 dias)
*CPDA2: CPDA1 con mayor concentracion de adenina y glucosa. (42 dias)
*SAG: Solucion salina adenina y glucosa (SOLO PARA GRE -35 dias)

MODIFICADORES DEL SAG:
*Circle pack: Elimina los GB de los GR
*ADSOL: Mayor concentracion de adenina y glucosa.
Estabiliza membrana y evita hemolisis

GRUPOS SANGUINEOS

Los eritrocitos estan rodeados por una membrana o capa externa, formada por proteinas, lipidos y azucares. Algunos segmentos de esta membrana son muy especificos para todos los eritrocitos de una persona y son heredados de sus padres a hijos. Estos segmentos, de estructura y de formacion muy especifica , son los que determinan los grupos sanguineos.

De esta manera una persona puede diferenciar a sus propias celulas de ajenas. Los grupos sanguineos se organizan, cada sistema contiene varias y diferentes substancias de grupo, ejem: sustancia A y sustancia B en el sistema ABO.

SISTEMA DE ABO

Grupos: A, B, AB, y O.

SISTEMA DE RH

D, d, C, c, E, e.

De rutina en los bancos de sangre se identifican es decir, se tipifican, solamente los grupos ABO y el Grupo de D del sistema Rh.

LA SANGRE

El cuerpo humano esta formado por innumerables celulas individuales. Al comienzo de toda celula se originan de un solo ovulo fertilizado , pero durante de el periodo fetal se van desarrollando lentamente un gran numero de celulas especializadas, con funciones separadas en el individuo.
Las celulas identicas forman los tejidos del organismo, por ejemplo: musculos, vasos sanguineos, huesos, etc. Cada celula tiene su propio metabolismo y vive su propia vida independientemente de las celulas que a rodean.
Cada celula requiere de nutrientes, de oxigeno, y de la remocion de sustancias de desecho, como: el dioxido de carbono y el amoniaco.
El numero de celulas funcionales en un tejido determinan la capacidad de transporte de los nutrientes, del oxigeno de las substancias de desecho, de la celula hacia la sangre y de la sangre hacia las celulas.
La funcion celular es controlada por hormonas, que deben ser transportadas desde la sangre hacia las celulas. Las celulas de los tejidos son muy delicadas y necesitan protegerse de substancias y de celulas extrañas. Esta proteccion en primer lugar la constituyen, la piel y las mucosas y luego los leucocitos del tejido sanguineo, que son transportados hacia la celulas de otros tejdos, por ejemplo; en caso de una agresion bacteriana.

COMPONENTES DE LA SANGRE:
*PLASMA:
-Agua
-Sales
-Moleculas organicas hidrosolubles ejem: la glucosa
-Proteinas

*CELULAS DE LA SANGRE
Formada por:
-Eritrocitos
-Leucocitos
-Granulositos
°Neutrofilos
°Eosinofilos
°Basofilos
-Monocitos
-Linfocitos
-Plaquetas